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Vous parlez souvent de PCR pour faire le diagnostic du chik. Qu’est ce exactement ?

  Mise en ligne le : 24/03/2006 Dernière révision :
 

PCR pour les réunionnais signifie Parti Communiste Réunionnais.
Il s’agit ici de la RT-PCR. RT pour rétro transcription et PCR pour Polymerase chain reaction.

De quoi s’agit-il ? Cette méthode de diagnostic récente et très sensible ne s‘applique pas uniquement au chik, mais à beaucoup d’infections virales ou bactériennes.
Tout d’abord, on transforme l’ARN en ADN, puis sur l’ADN on fait une réaction de polymérisation en chaîne, la polymerase chain reaction. On amplifie un bout du génome viral (recueilli dans le sang ou un autre tissu d’un patient) et on le multiplie (par polymérisation) en utilisant 2 amorces de la partie à amplifier. Pour se faire, il faut dénaturer l’ADN en séparant ses 2 brins afin que les amorces se fixent sur chaque brin. L’activité d’amplification recopie le brin complémentaire en utilisant les acides nucléiques du milieu (le milieu, c’est le réactif). Un brin donne donc 2 brins et on recommence ce cycle 30 fois jusqu’à obtenir 1 million de brins. Puis, sur ce matériel abondant, on applique les techniques classiques de détection de type ELISA pour identifier le virus ou la bactérie.
La RT-PCR du chik est réputée facile : sa réalisation ne prend que 3 heures. C’est beaucoup moins que la mesure des Immunoglobulines M (IgM) qui peut prendre 8 heures. Rappelons que la RT-PCR détecte directement le virus, qu’elle est positive dès la veille du début de la maladie et qu’elle ne dure que ce que dure le virus : environ une semaine. Passé ce délai, le diagnostic ne peut être fait que par la recherche des IgM à partir du 5e jour, puis des IgG à partir du 15e jour.

Enfin, la RT-PCR est un système de mesure basé sur la spécificité du système d’amplification. La présence d’héparine ou une hémolyse du prélèvement altèrent fortement sa sensibilité en gênant la polymérisation.

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Dernière modification : samedi, 16. décembre 2006 09:13